一、常规轻度堵塞（出液变慢、轻微压力升高，未完全堵死）

首选温和碱性冲洗（最通用）

0.1 mol/L 氢氧化钠（NaOH）水溶液

• 原理：稀碱可以水解蛋白肽键，溶解变性吸附蛋白，适配 Waters、安捷伦、岛津 UPLC 进样毛细管、不锈钢毛细管、进样针管路；

• 操作：吸取碱液反冲进样针 / 毛细管，之后用超纯水彻底冲净碱残留，避免碱腐蚀管路、损伤密封垫圈。

搭配助剂提升溶解效果（蛋白粘附顽固）

0.1 M NaOH + 少量异丙醇（5%~10%）

醇类削弱蛋白疏水附，碱负责水解蛋白，疏水蛋白堵塞效果更好。

二、中度顽固堵塞（流速明显不畅、压力偏高）

0.5 mol/L NaOH 浓碱冲洗，期间多次推拉液体循环冲刷；

⚠️ 注意：不锈钢毛细管耐受稀碱，PTFE、 peek 管路短时可用，不可长时间高温浸泡，防止老化。

备选：1% SDS 十二烷基硫酸钠水溶液（蛋白去污剂）

SDS 可包裹蛋白破坏疏水相互作用，洗脱管壁吸附蛋白；

洗完务必大量纯水冲洗干净 SDS 残留，残留会导致基线噪音、鬼峰。

三、重度完全堵死（液体无法贯通）

蛋白专用消解方案：

0.1% 胰蛋白酶缓冲溶液（pH7.4 磷酸盐缓冲液配制），室温浸泡数小时，酶解凝固蛋白；酶冲洗完毕后纯水冲洗，再用稀碱收尾除菌除蛋白残留；

物理辅助：若为可拆卸短毛细管，轻柔超声清洗（纯水 + 稀碱混合液超声 5~10min），严禁大功率长时间超声，避免毛细管形变、内径偏差。

四、冲洗后收尾关键步骤（必不可少）

大量超纯水冲洗管路 / 毛细管，彻底清除碱、SDS、蛋白酶残留；

依次过渡：5% 甲醇水溶液→纯甲醇封存，防止管壁滋生微生物、蛋白再次吸附；

禁止直接用纯有机溶剂冲洗堵塞蛋白：有机溶剂会让残留蛋白进一步变性固化，堵塞会更严重。